荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。
荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。
荧光显微镜的使用:
1、将材料片放在显微镜的载物台上。
2、打开荧光显微镜稳压器,然后启动紫外灯,紫外灯15min内不得关闭,关闭后3min内不得再启动。
3、将激发滤光片转至v,分色片调到v,选用495或475nm阻挡滤光片。
4、选用uvFL40、uvFL100荧光接物镜镜检。
5、在玻片上加无荧光油,先用40 x,再用100 x调焦镜检.呈现荧光。
6、因荧光物质受紫外光照射时随时间的增长荧光逐渐变弱,因此镜检时应经常变换视野。
7、亦可用uvFL10或uvFL20低倍镜镜检材料(用低倍镜时不加无荧光油)。