MF荧光倒置显微镜的调整主要有哪些内容?
为了使
MF荧光倒置显微镜的视野能受到均匀而又充分的照明,在显微镜初次安装和调试时,就必须把照明光路系统调整好,这是正确使用显微镜,并获得正确、可靠结果的重要手段和基本的要求。
此外,正确掌握照明光路系统的调整,是使用过程中更换光源灯泡后所必经的步骤,也是在日常使用过程中不时地检验显微镜性能的必要手段。显微镜照明光路系统的调整主要有以下内容:
(1) 照明光源灯室在显微外的初步调整
① 首先将灯室的外壳打开,压弹簧夹子将卤素灯泡装入插座中,安装时避免手指直接接触灯泡(可用柔软的布或纸隔住),以免灯泡上留有指纹等脏物,影响灯泡的使用寿命。
② 把灯室摆在桌面上,接通电源后,用的螺丝刀调节灯的调焦旋钮孔(标有“←→”),使灯丝投影在1-2m外的墙上,将灯丝成像调至清晰;然后调节灯的高低位置调节丝孔(标有“──”),使MF荧光倒置显微镜灯丝位置高 低适当;再调节灯的左右位置调节螺丝孔(标有“──”),使灯丝左右位置合适。
(2) 光源发光体(灯丝)在显微镜内位置的检验和校正目的是为了把发光体的像端端正正地调入物镜的视域范围内,从光源的角度去确保的视域受到充分而均匀的照明,这是调整库勒照明系统的前提条件,需要的 基本工具:对中望远镜购置显微镜时已配备。
MF荧光倒置显微镜观察标本制作要求
1、载玻片。载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的载玻片,一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光,有时需用石英玻璃作为载玻片。
2、盖玻片。盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涩盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的光起不同干涉作用的物质(如氟化镁)的盖玻片,它可以使荧光顺利通过,而反射 激发光,这种反射的激发光可激发标本。
3、标本。组织切片或其他标本不能太厚,如太厚激发光大部分消耗在标本下部,而物镜直接观察到的上部不能被充分激发。另外,细胞重叠或杂质掩盖,影响判断。
4、封裱剂。封裱剂常用甘油,必须无自发荧光,无色透明,荧光的亮度在PH8.5~9.5时较亮,不易很快褪去。所以,常用甘油和0.5mol/L PH9.0~9.5的碳酸盐缓冲液的等量混合液作封裱剂。
5、镜油。一般用MF荧光倒置显微镜和油镜观察标本时,必须使用镜油。好使用特制的无荧光镜油,也可用上述甘油代替,液体石蜡也可用,只是折光率较低,对图像质量略有影响。