荧光原位杂交分析系统核心原理是基于核酸的互补配对原则。当一个荧光标记的DNA或RNA探针与细胞内的目标核酸序列杂交时，该探针能够与目标序列形成稳定的复合物。通过特定波长的激光激发，荧光探针发出可被检测的荧光信号，研究人员可以通过荧光显微镜观察到这些信号的位置和强度。这种方法不仅能够提供目标序列的空间位置信息，还能用于分析基因的拷贝数变异、染色体重排及其他基因组的结构特征。
实验步骤：
1.样本制备：选择合适的细胞或组织样本，通常需要对样本进行固定（e.g.,甲醛固定）及透化处理，以便探针能够进入细胞。
2.探针标记：合成特异性荧光标记探针，这些探针通常是针对特定的DNA或RNA序列。
3.杂交反应：在适当的温度和时间下，将标记探针与样本中的目标核酸进行杂交。该步骤往往需要优化杂交条件以提高特异性和灵敏度。
4.洗涤：杂交后，对样本进行洗涤，以去除未结合的探针，减少背景信号。
5.荧光显微镜观察：使用荧光显微镜观察样本，记录探针与目标序列的荧光信号，可以使用图像分析软件进行后续数据处理。
应用领域：
1.医学诊断：广泛应用于癌症研究，通过检测肿瘤细胞中的特定基因扩增或缺失，为癌症的早期诊断和预后评估提供重要依据。例如，某些乳腺癌患者可以通过HER2基因的FISH检测来指导靶向治疗。
2.遗传学研究：可用于分析动物和植物的基因组结构，包括染色体重排、易位、缺失等，帮助研究遗传病的机制和基因功能。
3.细胞生物学：可以用于研究细胞内基因表达的空间分布，揭示基因在细胞发育和分化过程中的调控机制。
4.微生物研究：在微生物领域，FISH可以用来检测和定位特定微生物群落的存在，例如在环境样本或临床样本中。
荧光原位杂交分析系统的优势：
1.高灵敏度：FISH技术能够检测到单个细胞中的基因表达情况，灵敏度高且特异性强。
2.实时观察：通过荧光显微镜可以实时观察细胞中的目标序列，直观展示其空间分布。
3.多重检测：可通过使用不同荧光标签的探针，同时检测多个目标序列，提供更全面的基因组信息。
4.减少假阳性：杂交过程中的严格条件能够降低非特异性结合的几率，从而提高检测特异性。
地址：广州市天河区华观路1933号万科云A栋506（总部）
手机： 18026273340
邮箱：mshot@mshot.com
在线客服
电话咨询