显微镜能怎样看细菌？细菌镜检方式大盘点

显微镜能看细菌，是大部分人对显微镜的直观认知；把手放在显微镜下看细菌，是大部分小朋友的直觉操作……当然，这样可看不到细菌，那么显微镜应该怎么看细菌呢？今天我们就来盘盘细菌镜检的方式。

·常规细菌镜检方式：生物显微镜 + 革兰氏染色等明场染色

明美生物显微镜ML51（左）和ML51-N（右）

细菌和真菌尺寸都非常小，直接观察非常难看清，因此一般细菌观察都需要经过染色，其中方法之一是革兰氏染色。

革兰氏染色是使用广泛的一种细菌鉴别方法，革兰氏阳性菌染色后呈紫色，阴性菌呈红色，染色后不仅可以看清细菌型态、排列和结构特征，还对抗生素选择有指导意义。我们来给大家看看一些常见的细菌经过革兰氏染色后的样子。

这是蜡样芽孢杆菌，呈紫色杆状，革兰氏阳性菌，可引起食物中毒、呕吐。

这是肉毒杆菌，总体呈紫色，革兰氏阳性菌，其次有阴性反应的芽孢，呈红色，总体形状看起来像个汤匙，会产生剧毒的肉毒毒素。

为了呈现细菌鞭毛，还有专门的鞭毛染色法，比如Leifson氏鞭毛染色法和Bailey氏鞭毛染色法，可以将鞭毛染成红色，以便生物显微镜观察。

抗酸染色下的杆菌（红色）

革兰氏染色主要问题是步骤比较繁琐，如果不需要分辨革兰氏阳性阴性，那么也可以简单点用吉姆萨染色或者抗酸染色等方法。另外由于细菌尺寸很小，用低倍镜检容易漏，检出率不理想，而如果用100X油浸物镜高倍镜检，小批量还能处理，大批量的话效率堪忧。

·高效的细菌/真菌镜检：荧光显微镜 + 荧光染色

明美荧光显微镜下的细菌

为了提升细菌和真菌的检出率，很多医院目前都已经改用了明美的荧光显微镜做荧光镜检。

荧光观察下的念珠菌（红色）

荧光染色剂可以将细菌、真菌等目标特异性染色，经过荧光显微镜激发观察，目标将会呈现明亮的荧光反应，而背景和其他无关目标将呈现为暗色到纯黑，即便用低倍物镜也能快速发现这些荧光反应，从而大大提升诊断的速度和准确性。

不同的荧光染料可以染色不同的细菌，可以据此快速判断是否存在特定种类细菌，我们来给大家分享下一些常见的细菌在荧光显微镜下的样子。

大肠杆菌，上厕所不洗手可能会感染，导致腹泻。

沙门氏菌，生鸡蛋容易感染，导致食物中毒。

结核杆菌，会导致结核病，属于呼吸道七联检之一，其他还有六种病原体也是用荧光观察进行判定的。

新生隐球菌，常见于鸽粪的致病真菌，对免疫力低的人能造成较大伤害。

白念珠菌，也是常见真菌，正常人也会有少量，免疫力低可能会失控增殖进而致病。

·普通人看细菌的方法：一台靠谱显微镜 + 四种简单方法

医院用ML51-N看血涂片

上面都是科研和医疗层面常用的细菌观察方式，不仅需要比较高预算的仪器设备和配套耗材，还需要比较强的专业技能，那么普通人想看细菌能怎么做呢？

首先是选择一台靠谱的显微镜。这里要纠正一个某宝、某多多等电商平台的概念误导，不存在什么“上万倍放大的光学显微镜”。由于光学限制，一般的显微镜放大倍率上限在1000倍左右，也就是100X物镜搭配10X目镜，就到头了，所谓万倍放大只会让成像偏暗且模糊，没有意义。

生物显微镜ML11

常规的生物显微镜，如很多学校在用的ML11，标配4X/10X/40X/100X四种物镜，可以用40X或者100X看细菌。正常渠道四个倍率全齐的新机肯定要千元以上，低于千元的画质和做工堪忧，不建议买，关注明美看图就好了。使用100X油浸物镜可以看到更丰富的细菌细节，但这种高倍油浸物镜使用比较难，需要先学习、准备好耗材再操作。

吉萨姆染色下的细菌

有靠谱仪器后，下一步就是方法了。首先是经典的明场染色，革兰氏染色耗材比较多，步骤比较繁杂，不建议普通人从这个方法上手，建议选择吉萨姆染色，耗材和步骤相对简单，而且染色液也相对革兰氏染色液更便宜。

如果不想倒腾染色，也有三种不染色的方法。

相衬观察下的支原体（小黑点）

第一种方法是相衬观察。相衬观察是适合看未染色的细胞、细菌等样品的科学方法，它能将样品厚度差异转化为图像对比度，从而勾勒出样品的型态。相衬观察需要专门的相衬物镜和相衬聚光镜，倒置显微镜通常会配备这些，正置显微镜也能通过升级相衬物镜和相衬聚光镜实现，但相衬套装通常比较贵。

暗场下的血红细胞

第二种方法是暗场观察。暗场观察利用的是丁达尔效应，就是阳光斜照让灰尘都清晰可见的那种现象，它可以形成黑背景、亮样品的高对比度图像。暗场观察可以通过简易暗场聚光镜实现，只需在聚光镜下安装暗场环，然后把聚光镜调到最高位置观察即可，ML31等生物显微镜有标配的暗场环可以选购。

斜照明下的酵母菌

最后一种方法是斜照明观察。这种方法可以让透明样品形成强立体感，但会形成明显的色差（紫边、彩色边），同时画面亮度会不均匀。生物显微镜可以体验，方法很简单，直接把手伸到阿贝聚光镜底部，将大部分光照遮住，留下边缘一条缝，一边观察一边调整手遮的位置和方向。明美体视显微镜MZX100可调角度透射式底座就是利用斜照明技术，可以用于观察透明的卵母细胞等样品。

总结：用显微镜看细菌还真不是简单操作，需要成像质量好的生物显微镜或荧光显微镜，方法包括革兰氏染色等明场染色、FITC-D-Lys等荧光染色、相衬观察、暗场观察和斜照明观察。对于大型医院等机构，MF31-M荧光生物显微镜还是很好的选择，快捷高效；其他机构可以考虑ML31/ML11生物显微镜搭配革兰氏染色等明场染色；简易暗场和斜照明技术要求，但效果也相对难调好，只建议普通用户尝试。

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