今年的甲型流感可谓来势汹汹,不仅患者症状较重,而且学生群体感染比例相当高,有些中小学甚至到了无法正常线下教学的程度,流感的有效检测和预防,又再成为关注焦点,悄悄告诉大家,显微镜在这里面可是有重要角色的。
流感病毒(Influenza)根据病毒核蛋白和基质蛋白,可分为甲乙丙丁(ABCD)四型,其中对人造成比较大威胁的是甲型(Influenza A)和乙型(Influenza B),对免疫力低下的人群都可能造成致命后果,尤其甲型流感,杀伤力通常比乙型流感更强。甲型流感按血凝素HA和神经氨酸酶NA的蛋白结构和基因型进行分型,于是就有了H1N1流感、H3N2流感等分型命名。乙型流感则分为Victoria系和Yamagata系。我们常看到新闻报道H1N1之类,就属于甲型流感。甲型流感可以感染禽类、猪、马、海豹、鲸鱼、水貂等动物,如果H5N1等、猪流感突然变异成能够感染人,那往往会带来严重后果,因为这样的病原体对人体免疫系统来说是很陌生的,难以应对。按2020版的流行性感冒诊疗方案,以临床表现(症状)结合一种或以上的病原学检测结果阳性,来判断确诊流感。病原学检测主要分抗原检测、核酸检测、培养分离和血清学检查四种,其中常用的是前面两种。核酸检测大家不陌生,就是拭子采样然后用PCR检测。抗原检测大家是否还记得?我们在家就能自己做的那种胶金体检测就属于抗原检测,胶金体抗原检测属于低灵敏度检测,有时候可能检测不出阳性。在医院等医疗机构,我们有更高灵敏度、高特异性的抗原检测方法,免疫荧光法,比如体现为呼吸道七联检或者呼吸道九联检,使用荧光显微镜进行观察判断。顾名思义,呼吸道七联检/九联检是一次同时检测七种/九种呼吸道病原体,以更快速判断呼吸道感染情况,其中两个孔位包括甲型流感和乙型流感。使用荧光显微镜400倍视野观察(40X物镜),甲型流感检测孔位荧光少且弱,视为阴性结果,荧光亮度强数量多,平均每个视野的阳性细胞大于3-5个,就可以判断为阳性。乙型流感另有一个孔位,判断标准和甲型流感一致。免疫荧光法检测快速,而且准确性高于胶金体法,因此得到越来越多医疗机构的选择。预防流感病毒,首先当然还是提倡勤洗手多通风,然而就是尽量接种疫苗,尤其是以下高危人群:5岁以下儿童、65岁及以上老人、肥胖者、妊娠及围产期妇女,以及有慢性呼吸系统疾病等基础疾病的人。目前国内流感疫苗主要有三类,三价灭活(IIV3)、四价灭活(IIV4)和三价减毒活疫苗(LAIV3),都能为甲型流感H1N1、H3N1和乙型流感Victoria系提供保护,四价灭活还能额外保护乙型流感Yamagata系。那么流感疫苗是怎么制作的呢?首先和很多其他灭活疫苗一样,有细胞培养生产裂解疫苗工艺。裂解疫苗使用细胞培养增殖病毒,再通过裂解,去除大分子蛋白和病毒核酸,仅保留有较高免疫原性的血凝素HA和神经氨酸酶NA等蛋白,形成裂解疫苗,这个过程中会使用倒置显微镜对细胞培养的情况进行观察。另一种工艺就比较魔性了,用鸡蛋培养。这些鸡蛋看起来跟我们买的鸡蛋差不多,但又不是一般鸡蛋,它们全是高洁净度的SPF受精蛋,里面是有鸡胚胎的。上一年两种流感的基因会在鸡蛋清中自然混合,形成适合使用的新流感品种,每个鸡蛋可以做出一剂或几剂疫苗。这个工艺把鸡蛋当成生物反应器用,好处是设备要求低,因此起步成本低,坏处是生产周期长、产能提升难、以及病毒错配失效等问题,比如今年流感疫情大大影响鸡蛋价格,这种方式就不灵了,这推动了更多企业要转向细胞培养方式。总结:流感不仅是一种古老的疾病,还是一种讲长期存在、不太可能消失的疾病,对于老人小孩和慢性疾病患者,还是接种疫苗进行保护好,无论选择三价灭活、四价灭活还是三价减毒,都能为比较高危险的甲型流感提供保护,所以是值得投入的。明美是一家专注显微成像产品研发与销售的高新技术企业,是中国仪器仪表行业协会光学分会理事单位,医疗器械显微镜生产及经营厂家。
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